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核酸提取試劑盒的工作原理

核酸提取試劑盒的工作原理子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中qPCR、分子克隆、下一代測(cè)序等都需要進(jìn)行DNA提取。如今，大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室都使用商業(yè)DNA提取試劑盒，這些試劑盒使用硅膠自旋過(guò)濾法來(lái)獲得高質(zhì)量的DNA。這些可以快速有效地純化DNA（或RNA），在這里需要先了解一下DNA提取試劑盒的工作原理。核酸提取試劑盒的工作原理離心柱包含一種硅膠樹(shù)脂，可根據(jù)鹽條件和受提取方法影響的其他因素選擇性地結(jié)合DNA和RNA。這些DNA提取試劑盒使整個(gè)過(guò)程比舊的DNA分離方法更容易、更快。但是，使用套件的缺點(diǎn)是，...

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DNA 提取實(shí)驗(yàn)中的常見(jiàn)問(wèn)題解析

分子生物中RNA和DNA提取會(huì)常常遇到一些問(wèn)題，下面小編就RNA和DNA提取實(shí)驗(yàn)中的通常遇到的幾個(gè)問(wèn)題進(jìn)行解析。1.提取產(chǎn)量低如果您遇到的DNA/RNA產(chǎn)量低于您對(duì)樣品的預(yù)期，則需要考慮許多因素。通常，這是一個(gè)裂解問(wèn)題。未裂解是產(chǎn)量低的主要原因。它也可能是由不正確的綁定條件引起的。確保使用新鮮的優(yōu)質(zhì)乙醇（100%200標(biāo)準(zhǔn)）稀釋緩沖液或添加到結(jié)合的步驟。劣質(zhì)乙醇或舊庫(kù)存可能已經(jīng)吸收了水分，并且濃度不正確。如果洗滌緩沖液制備不正確，您可能正在洗掉提取的DNA或RNA。2.提取低...

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生物實(shí)驗(yàn)室操作技術(shù)規(guī)范

病原微生物實(shí)驗(yàn)操作規(guī)范病原微生物接種的操作規(guī)范：做到以下4點(diǎn)能較大限度地減少接種時(shí)氣溶膠的產(chǎn)生。1.打開(kāi)菌種管時(shí)，將安瓿管頸部燒熱，用冷的濕棉球使之突然破裂，才可以大大減小溶膠的產(chǎn)生。2.劃板時(shí)，瓊脂平板要選用表面光滑的；接種環(huán)應(yīng)用彈性小的金屬絲制作，絲桿要短，環(huán)不宜過(guò)大，劃板動(dòng)作要輕。3.接完種后，蘸有菌液的接種環(huán)應(yīng)在含有消毒液的毛巾上吸干后再放到火焰上灼燒到紅。4.混勻微生物懸液的時(shí)候，旋轉(zhuǎn)式搖動(dòng)，不能左右搖動(dòng)；搖動(dòng)時(shí)動(dòng)作輕柔不要使懸液弄濕試管塞。生物樣本移液操作規(guī)范生物...

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生命科學(xué)研究中常用的幾種實(shí)驗(yàn)方法

生命科學(xué)研究時(shí)生物學(xué)的分支，下面介紹幾個(gè)關(guān)于生命科學(xué)常用的幾種實(shí)驗(yàn)方法：一、BCA法測(cè)蛋白質(zhì)濃度實(shí)驗(yàn)原理：BCA(bicinchoninicacid，二辛可酸)法測(cè)定蛋白質(zhì)即在堿性條件下蛋白質(zhì)與Cu2+絡(luò)合，并將其還原成Cu1+。Cu1+和BCA試劑反應(yīng)使其由原來(lái)的蘋(píng)果綠形成穩(wěn)定的紫藍(lán)色復(fù)合物，在562nm有強(qiáng)烈的光吸收，且吸光值和蛋白質(zhì)濃度在廣泛范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系，因此可用于蛋白質(zhì)濃度測(cè)定。二、免疫組化原理:免疫組織化學(xué)，即免疫組化，是應(yīng)用免疫學(xué)基本原理一-抗原抗體反應(yīng)...

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實(shí)時(shí)熒光定量 PCR技術(shù)

實(shí)時(shí)熒光定量PCR，簡(jiǎn)稱(chēng)RT-QPCR,屬于Q-PCR的一種，目前該技術(shù)已得到廣泛應(yīng)用，如：擴(kuò)增特異性分析、基因定量分析、基因分型、SNP分析等。熒光定量PCR常用的方法是DNA結(jié)合染料SYBRGreenⅠ的非特異性方法和Taqman水解探針的特異性方法。SYBRGreenI是一種結(jié)合于所有dsDNA雙螺旋小溝區(qū)域的具有綠色激發(fā)波長(zhǎng)的熒光染料，可與所有的各種序列的雙鏈DNA分子結(jié)合。在游離狀態(tài)下，SYBRGreenI發(fā)出微弱的熒光，但一旦與雙鏈DNA結(jié)合，嵌入至dsDNA，熒...

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