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原生質(zhì)體葉肉細(xì)胞瞬時(shí)表達(dá)實(shí)驗(yàn)步驟

原生質(zhì)體葉肉細(xì)胞瞬時(shí)表達(dá)實(shí)驗(yàn)步驟1、生長(zhǎng)培養(yǎng)好的試驗(yàn)材料（一般為生長(zhǎng)20天左右的擬南芥幼苗葉片）2、在擬南芥開花前取樣（30片葉子左右即可）3、切取葉片為0.5-1mm的細(xì)條（如果材料能達(dá)到每克107個(gè)原生質(zhì)體，10-20片葉子需要5-10mL酶解液）4、迅速將切下的樣品轉(zhuǎn)到酶解液中，要求全浸沒。5、黑暗條件下抽真空30min。6、連續(xù)酶解，室溫下23℃黑暗中靜止酶解3h7、利用光學(xué)顯微鏡檢查原生質(zhì)體（30-50μm大小）8、在過(guò)濾前加入等量的W5溶液9、洗干凈濾網(wǎng)，并用W5...

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HEK293培養(yǎng)基選購(gòu)指南

嘿，小伙伴，HEK293細(xì)胞咋養(yǎng)??？用啥培養(yǎng)基呀？哈哈，這個(gè)簡(jiǎn)單，毋庸置疑地告訴你，DMEM和RPMI都行啊！HEK293細(xì)胞是廣泛應(yīng)用于科研領(lǐng)域的一種細(xì)胞模型，當(dāng)然要注意選用適合它們的培養(yǎng)基啦。妥妥地，你得選擇營(yíng)養(yǎng)豐富、含有充足生長(zhǎng)因子和營(yíng)養(yǎng)成分的培養(yǎng)基啊。DMEM和RPMI這兩個(gè)培養(yǎng)基都含有足夠的碳水化合物、氨基酸和維生素，供給細(xì)胞所需的能量和材料，保證細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖。這兩種培養(yǎng)基各有千秋啊！DMEM培養(yǎng)基一般用于腫瘤細(xì)胞和無(wú)血清培養(yǎng)；而RPMI培養(yǎng)基則多用在白血細(xì)胞培養(yǎng)...

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MRC-5細(xì)胞培養(yǎng)基的選擇

MRC-5細(xì)胞是一種常用的人類胚肺細(xì)胞，是由1966年從一個(gè)正常的男性胎兒的肺部組織獲得，具有良好的細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖特性，可廣泛應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)、病毒研究和毒性測(cè)試等領(lǐng)域。在MRC-5細(xì)胞的培養(yǎng)中，使用的培養(yǎng)基非常關(guān)鍵，不同的培養(yǎng)基可會(huì)影響到細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖特性。MRC-5細(xì)胞培養(yǎng)基必須包含合適的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，能量來(lái)源和生長(zhǎng)因子以確保它們能夠健康地生長(zhǎng)和增殖。MRC-5細(xì)胞的培養(yǎng)基主要包括基礎(chǔ)培養(yǎng)基、補(bǔ)充物以及抗生素。[1640培養(yǎng)基]其中常使用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基是DMEM/F12（Dul...

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HEK293細(xì)胞培養(yǎng)培養(yǎng)基配制方法

為了確保HEK293細(xì)胞培養(yǎng)的穩(wěn)定性和成功性，在使用HEK293細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)，需要注意以下事項(xiàng)。培養(yǎng)液的配制HEK293細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用兩種培養(yǎng)液：DMEM和PMI。在配制培養(yǎng)液時(shí)要嚴(yán)格按照說(shuō)明書來(lái)操作，遵循一定的配方和流程。此外，建議在配制時(shí)使用熱處理的雙倍溶液，這樣能夠避免配制中出現(xiàn)pH值過(guò)高或低的問(wèn)題。篩選培養(yǎng)基在HEK293細(xì)胞培養(yǎng)基的篩選過(guò)程中，還需要考慮不同穩(wěn)定性和適應(yīng)性的培養(yǎng)基，以便更好地滿足試驗(yàn)要求。例如，當(dāng)進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)，選擇ProCHO5培養(yǎng)基，可以提高細(xì)胞...

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培養(yǎng)基種類和細(xì)胞培養(yǎng)基選擇

1、RPMI-1640MediumRPMI-1640廣泛應(yīng)用于哺乳動(dòng)物、特殊造血細(xì)胞、正常或惡性增生的白細(xì)胞，雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)，是目前應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基。主要用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴細(xì)胞、T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞以及HCT-15上皮細(xì)胞等均可參考使用。2、MinimumEssentialMedium（MEM）也稱非必需培養(yǎng)基，它僅含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素。成分簡(jiǎn)單，可廣泛適應(yīng)各種已建成細(xì)胞系和不同地...

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