細胞培養緩沖液有哪些？

一、細胞培養使用的碳酸氫鈉

碳酸氫鈉（NaHCO3）是細胞培養中常用的緩沖液，用于在4–10%二氧化碳存在的情況下維持培養基的 pH 值。此外，碳酸氫鈉提供一些營養價值，且很少對細胞有毒。

培養基中碳酸氫鈉的最終濃度取決于培養基的配方和培養箱的二氧化碳濃度。根據所用碳酸氫鈉的濃度，建議使用不同的 CO2 濃度。如果培養基配方包括：

NaHCO3（g/L）<1.5，需要濃度為4%的 CO2

NaHCO3（g/L）1.5–2.2，需要濃度為5%的 CO2

NaHCO3（g/L）2.2–3.4，需要濃度為7%的 CO2

NaHCO3（g/L）>3.5，需要濃度為10%的 CO2

二、細胞培養中使用的 HEPES 緩沖液

盡管碳酸氫鹽因其營養價值而成為常用的細胞培養緩沖液，但與 HEPES 緩沖液相比，碳酸氫鹽的緩沖能力在生理 pH 值時有所下降。HEPES 對細胞沒有營養價值，但可以添加到 pH 7.2 至 7.6 的緩沖細胞培養基中。因此，當需要在 CO2 培養箱外長時間處理細胞培養物時，添加 HEPES 可提供額外的緩沖能力。

Gibco HEPES 是一種兩性離子性的有機化學緩沖劑，被歸類為" Good "緩沖液，源于 Norman Good 博士和他的同事在1966年發現的一組緩沖液（Good 等人，Biochemistry 1966）。

"Good 緩沖液"（如 HEPES）具有以下特征：

l pKa 值在6.0至8.0之間

l 高溶解度

l 膜不通透性

l 對生化反應的影響有限

l 較低的可見光和紫外光吸收率

l 化學和酶促穩定性

l 易于制備

細胞培養基中 HEPES 的水平可以從 10 mM 到 25 mM 不等。在 Gibco DMEM 中，HEPES 的濃度為 25 mM。然而，在 Gibco MEM/F12 中，其濃度為 15 mM。常用的濃度為 25 mM。

三、其他細胞培養添加劑

1.  HOCH2CH2SH

HOCH2CH2SH 它能夠清除羥基自由基（等），可作為生物抗氧化劑。羥基可溶于水并可降低揮發性。

2.氨基酸溶液

要增加培養細胞的活性并刺激生長，可向培養基中添加氨基酸添加劑。此外，添加氨基酸添加劑可提供營養并減輕 體外細胞的生物合成負擔。 在蒸餾水中制備，該溶液中的非必需氨基酸濃度是 MEM-α 培養基中濃度的100倍。

3. HAT 添加劑

稀釋后的 HAT 適合用作融合后選擇培養基，以去除未融合或自融合的 HGPRT-骨髓瘤細胞。  葉酸拮抗劑、氨基喋呤抑制 從頭 核苷生物合成途徑。

4. MEM 維生素溶液

向培養基中添加 MEM 維生素溶液可增強培養中的細胞生長和活力，并減少體外細胞的生物合成負擔。在0.85%的鹽水中制備而成，該溶液中的維生素濃度是標準 MEM 培養基中濃度的100倍。

5.丙酮酸鈉

丙酮酸鈉通常作為額外的碳來源補充到細胞培養基中。用于細胞培養的 Gibco 丙酮酸鈉以100 mM（100倍）溶液的形式提供，最終濃度為 11,004 mg/L。

6.植物凝集素

植物凝集素是由紅腰豆菜豆粗提取物制成的溶液。當以一定濃度應用時，這種添加劑可以在體外誘導各種哺乳動物單核細胞中的芽基發育。

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