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胎牛血清的選購小技巧及檢驗標準

更新時間:2022-11-11點擊次數:1583
胎牛血清的選購小技巧及檢驗標準

胎牛血清 (FBS) 是來自胎牛的凝結血液的液體部分,不含細胞、纖維蛋白和凝血因子,但含有大量對細胞生長至關重要的營養和大分子因子。牛血清白蛋白是FBS 的主要成分。FBS 中的生長因子對于培養細胞的維持和生長至關重要。FBS 還含有多種小分子,如氨基酸、糖、脂質和激素。
 

FBS 應用廣泛。FBS 的主要用途之一是在真核細胞培養中,其濃度高達 20% 甚至更高,它提供許多促進細胞存活和增殖的必需營養素和生長因子。然而,需要注意的是,人類細胞培養物中的 FBS  可能會引入研究成果。用人類血清培養的人類細胞與用 FBS 培養的細胞表現不同。FBS 還用于人類和獸用疫苗以及生物技術藥物的研究、制造和控制,并用于阻止胰蛋白酶消化 或用作冷凍保存中的保護劑。

胎牛血清


為什么使用胎兒血清而不是新生兒血清或成人血清?

胎兒血清含有較多的生長因子,丙種球蛋白(即抗體)含量較低,非胎兒血清也有。這些很重要,因為生長因子促進細胞存活和增殖,而抗體可以與培養的細胞結合。此外,與成人或新生兒相比,胎兒血清中的補體蛋白(補體)含量較低。這些補體具有溶解培養細胞和干擾免疫測定的不良作用。


血清和血漿有什么區別?

血清和血漿均來自全血,通過離心去除包括紅細胞在內的成分。血漿和血清之間的區別在于,凝血蛋白存在于血漿中,但已從血清中去除。血漿一般是通過在離心前向血液中加入抗凝劑來制備的,但不會去除凝血蛋白。通過在離心前使血液凝固或通過廣泛/漸進離心來制備血清。因此,與凝血相關的纖維蛋白原和蛋白質不存在于血清中。


在人類中,以下 22 種蛋白質占血清和血漿總蛋白質含量的 99%:白蛋白、總 IgG、轉鐵蛋白、纖維蛋白原、總 IgA 、α-2-巨球蛋白、總 IgM、α-1-抗胰蛋白酶、C3 補體、結合球蛋白、α-1-酸性糖蛋白、載脂蛋白-B 、載脂蛋白-A1、脂蛋白 (a)、因子 H、銅藍蛋白、C4 補體、補體因子 B 、前白蛋白、C9  補體、C1q 補體和 C8 補體。剩下的 1% 包括數百種蛋白質。豐富的血清蛋白白蛋白,濃度為 50 mg/ml ,約占總蛋白質量的一半。


胎牛血清的檢驗標準是什么?

國際血清工業協會 ISIA是血清供應貿易組織,制定了質量控制標準化指南。這些指南要求使用特定方法進行以下測試,并且測試結果必須作為分析證書提供。

測試
細菌和真菌 - 無菌測試
支原體
細胞病變劑 - 病毒檢測
血液吸附劑 - 病毒檢測
牛病毒性腹瀉 - 病毒檢測
pH 測量
滲透壓
總蛋白, 雙縮脲法測定
內毒素
血紅蛋白
電泳圖
性能測試,例如干細胞培養
徑向免疫擴散
免疫球蛋白
γ-谷氨酰轉移酶 (GGT)

 

內毒素檢測

內毒素,也稱為脂多糖(LPS)或脂寡糖(LOS),來自革蘭氏陰性菌的外膜,有助于多種致病性革蘭氏陰性菌的臨床表現。在體內 ,內毒素會引起發燒和炎癥反應,而在細胞培養中它們會引起細胞反應的變化。
 

內毒素水平通過鱟變形細胞裂解物 (LAL) 測試或較新的合成測試(稱為重組因子測定)進行測量。變形細胞類似于脊椎動物中的白細胞,LAL 是由鱟 (美洲鱟;圖 1)的血液制備的。LAL 對內毒素非常敏感,即使存在微量的內毒素也會凝結。許多鱟種群處于危險之中,因此應注意保護它們免受 消 失。
 

圖 1.美洲鱟
 

不含外泌體或其他成分的 FBS

常規 FBS 含有大量細胞外囊泡,其中一些是外泌體。使用培養細胞進行外泌體研究時,使用不含外泌體的 FBS 至關重要。然而,重要的是要意識到,去除外泌體的 FBS  可能會以不同于常規 FBS 的方式影響和支持細胞生長。去除外泌體的 FBS 可以可以通過超速離心或超濾制備.
 

蘇州阿爾法生物13年專注于生物實驗室儀器及生物試劑耗材的供應,阿爾法試劑主要包括:胎牛血清,新生牛血清,培養基,抗體,天根質粒小提試劑盒,基因組提取試劑盒,純化試劑盒,一抗、二抗等。

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